細胞融(rong)合(he)儀(yi)

歐盟生(sheng)物(wu)實(shi)驗室設(she)備與(yu)維(wei)護集團(tuan)(Biologica lLaboratory Equipment, Maintenance and Service Ltd.簡(jian)稱(cheng)：BLS), BLS公(gong)司是歐洲(zhou)壹家專(zhuan)業生產(chan)電融合(he)設(she)備的廠(chang)家，尤(you)其(qi)在胚(pei)胎(tai)幹(gan)細胞的電融合(he)上(shang)面更具有*的技術。BLS產(chan)品的用戶(hu)遍布，用我(wo)們(men)的設(she)備發(fa)表的文(wen)章(zhang)每年多(duo)達數(shu)百篇。在CELL，NATURE以(yi)及NUCLEARACID等專業雜誌上經(jing)常(chang)可(ke)以(yi)見到BLS矯健的身影。其(qi)提供(gong)的大量(liang)文(wen)獻與(yu)PROTOCOL給用戶(hu)的科研工(gong)作(zuo)帶(dai)來(lai)極大的方便(bian)。

核(he)移植(zhi)是將(jiang)細胞核(he)從(cong)供體(ti)轉入受體(ti)的過(guo)程。細胞核(he)指(zhi)導胚胎(tai)的發育(yu)，導致新(xin)生體(ti)安全(quan)出生。在這個過(guo)程中，電(dian)融合(he)用(yong)於(yu)將供體(ti)細胞與(yu)受體(ti)卵(luan)細胞融(rong)合(he)，並(bing)進(jin)壹步激活(huo)細胞分裂(lie)，形成胚(pei)胎(tai)。Meng等人(1997)將(jiang)核(he)移植技術擴展(zhan)至靈(ling)長類(lei)動物模型，克(ke)隆出恒猴。技術的進步使研(yan)究(jiu)人員能夠(gou)從分裂(lie)球進展(zhan)至更高分化(hua)的胚胎(tai)細胞以(yi)及靜止(zhi)的胚兒(er)細胞，作(zuo)為(wei)核(he)的供應來(lai)源(yuan)。胚(pei)胎(tai)產(chan)生的細胞在(zai)體(ti)外培養(yang)6-13代，然(ran)後(hou)在轉入前使用(yong)血(xue)清(qing)饑(ji)餓(e)的方法(fa)使(shi)細胞靜(jing)止(zhi)。

如前文(wen)所(suo)述(shu)，Roble、Cibelli以(yi)及Stice是*次(ci)在(zai)1998年(nian)報(bao)告(gao)使用(yong)非(fei)老(lao)化胚成(cheng)纖維(wei)細胞作(zuo)為(wei)核(he)的供體(ti)進行核(he)移植(zhi)而(er)產(chan)生綿(mian)羊克(ke)隆轉基(ji)因(yin)牛(niu)的人。IanWilmut在(zai)1996年(nian)震驚了整個世(shi)界(jie)，他(ta)從成年(nian)乳腺的細胞產(chan)生出*個動(dong)物克(ke)隆——多(duo)利。使(shi)用分化(hua)的成年細胞進(jin)行克(ke)隆的能力打開(kai)了核(he)移(yi)植廣(guang)泛(fan)運用(yong)的大門(men)即(ji)基(ji)因(yin)治療(liao)的令(ling)人激動的模式(shi)。zui近的成功事例(li)PPLTherapeutics公司從成年(nian)體(ti)細胞克(ke)隆出豬。對於(yu)這(zhe)些(xie)用(yong)途可(ke)以(yi)使用多(duo)種(zhong)細胞融(rong)合(he)樣(yang)品(pin)池及微(wei)型載玻片(pian)。

CF-150B胚胎(tai)細胞融(rong)合(he)儀(yi)器(qi)和相(xiang)關(guan)電(dian)極槽(cao)(GSS-250)專為(wei)哺乳(ru)動(dong)物(wu)胚胎(tai)分裂(lie)球電融(rong)合(he)而(er)設(she)計，可(ke)在電(dian)解液(ye)或非(fei)電(dian)解液(ye)中(zhong)運用(yong)。壹(yi)個適當(dang)導向的短(duan)電脈(mai)沖(chong)施(shi)加(jia)在(zai)早(zao)期(qi)胚胎(tai)可(ke)以(yi)溶解細胞膜，從而(er)完成(cheng)細胞質和細胞核(he)融(rong)合(he)。此(ci)儀(yi)器(qi)的主(zhu)要(yao)應用是(shi)產(chan)生小鼠(shu)四(si)倍(bei)體(ti)胚胎(tai)產(chan)生和體(ti)細胞核(he)轉移(yi)克(ke)隆。標(biao)準的雙(shuang)細胞分裂(lie)期胚(pei)胎(tai)能(neng)夠(gou)迅速地(di)融(rong)入單個細胞(單(dan)細胞分裂(lie)期四(si)倍(bei)體(ti)胚胎(tai))。這(zhe)種(zhong)四(si)倍(bei)體(ti)胚胎(tai)可(ke)用於(yu)與(yu)遺傳(chuan)控制(zhi)小鼠(shu)胚胎(tai)幹(gan)細胞(ES)聚(ju)合(he)，從(cong)而(er)產(chan)生*的ES衍生(sheng)細胞胎(tai)兒(er)(Nagyetal.,1990;NagyandRossant;1993)。

　　3、zui近，gene-trap戰略(lve)用於(yu)衍生(sheng)ES胚(pei)胎(tai)聚(ju)合(he)，此(ci)胚(pei)胎(tai)由(you)ES四(si)倍(bei)體(ti)細胞胚(pei)胎(tai)產(chan)生，從而(er)獲取基(ji)因(yin)表達模式(shi)的直(zhi)接(jie)信息(xi)

CF-150B細胞融(rong)合(he)儀(yi)和(he)專業設(she)計的高精度電極槽(cao)壹起(qi)使(shi)用。槽(cao)有三種不(bu)同(tong)的縫間隙，250µm,500µm和(he)1000µm，型號名(ming)分別(bie)為GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在(zai)做(zuo)雙(shuang)細胞期(qi)分裂(lie)球融合(he)時(shi)，任(ren)何壹種(zhong)槽(cao)均可(ke)使用(yong)。如果(guo)用於(yu)克(ke)隆目(mu)的，我們推薦(jian)GSS-250。電(dian)極材料(liao)是(shi)高品質不(bu)銹(xiu)鋼(gang)的，並將其(qi)安置(zhi)在(zai)壹(yi)種(zhong)厚玻璃中。所(suo)有這(zhe)些材料具有生(sheng)物安全(quan)性(xing)，無(wu)毒。

CF-150B和專業設(she)計的電極夾GSH-1壹(yi)起(qi)使(shi)用.此(ci)“快速夾(jia)"設(she)計使(shi)得電(dian)極牢(lao)固(gu)夾(jia)在(zai)組(zu)織(zhi)培養(yang)板(ban)(或其(qi)蓋(gai)上)。在融(rong)合(he)過(guo)程中不(bu)會(hui)有偶(ou)然(ran)的滑動，並且給電極線(xian)提供(gong)了的良(liang)好(hao)接(jie)觸。電極夾可(ke)用於(yu)三種裏任(ren)何壹(yi)種(zhong)電(dian)極GSS-250,GSS-500orGSS-1000。

CF-150B和新(xin)型設(she)計的聚(ju)合(he)針DN-10壹起(qi)使(shi)用.在(zai)組織(zhi)培養(yang)板(ban)底(di)部(bu)形成壹(yi)個小(xiao)凹(ao)陷(xian)以(yi)便(bian)小(xiao)胚胎(tai)的聚(ju)集，例(li)如胚胎(tai)、ES細胞塊以(yi)及移植(zhi)早(zao)期(qi)的鼠(shu)胚胎(tai)。和(he)附(fu)件(jian)球壹起(qi)使(shi)用，這(zhe)些針頭更符(fu)合(he)人體(ti)動力學(xue)，在使用中(zhong)減(jian)少(shao)手指(zhi)和(he)手的壓力。

CF-150B和聚(ju)合(he)針頭DN-09壹(yi)起(qi)使(shi)用.聚(ju)合(he)針DN-09是zui初(chu)設(she)計的聚(ju)合(he)針頭，在(zai)組織(zhi)培養(yang)板(ban)底(di)部(bu)形成壹(yi)個小(xiao)凹(ao)陷(xian)以(yi)便(bian)小(xiao)胚胎(tai)的聚(ju)集，例(li)如胚胎(tai)、幹(gan)細胞以(yi)及移植(zhi)早(zao)期(qi)的鼠(shu)胚胎(tai)。

如果(guo)所有參(can)數(shu)都選擇*(*按(an)照(zhao)BLS的protocol)，融合(he)率(lv)將(jiang)高(gao)於(yu)90%，胚胎(tai)在(zai)融(rong)合(he)過(guo)程中死(si)亡(wang)率(lv)低(di)於(yu)10%，並(bing)且24小時(shi)內至(zhi)少80%成(cheng)功融合(he)的胚胎(tai)將(jiang)成(cheng)長為(wei)健康的四(si)細胞期(qi)胚(pei)胎(tai)。