壹(yi)文帶妳了解(jie)什(shen)麽(me)是熒光(guang)蛋白(bai)定位激發(fa)光(guang)源(yuan)
點擊次數:1525 更(geng)新時間(jian):2022-05-18
熒光(guang)是壹(yi)種光(guang)致(zhi)發(fa)光(guang)現象,必(bi)須(xu)提(ti)供光(guang)源(yuan)去激發(fa)分子產生(sheng)。物質(zhi)被(bei)激發(fa)光(guang)源(yuan)激發(fa)後(hou)過程(cheng)是因為分子吸(xi)收激發(fa)光(guang)被(bei)激發(fa)至(zhi)較高(gao)激發(fa)態後(hou),先經無(wu)輻射(she)躍(yue)遷(qian)(振動馳(chi)豫、內轉(zhuan)換)損(sun)失(shi)掉壹(yi)部分能量,到達(da)第(di)壹(yi)電子(zi)激發(fa)態的(de)低(di)振(zhen)動能級,再由(you)此發(fa)出熒光(guang)。
不同的(de)激發(fa)光(guang)源(yuan)的(de)波長是不壹(yi)樣(yang)的(de),不同頻率(lv)(波長)激發(fa)能量不同,只(zhi)有相對(dui)應的(de)激發(fa)光(guang)源(yuan)激發(fa)才能讓(rang)熒光(guang)分子無(wu)輻射(she)躍(yue)遷(qian)到達(da)第(di)壹(yi)電子(zi)激發(fa)態的(de)低(di)振(zhen)動能級,然後(hou)發(fa)出熒光(guang)。適(shi)合的(de)激發(fa)光(guang)源(yuan)需(xu)要進(jin)行(xing)試(shi)驗,使(shi)用濾光(guang)片過濾(lv)出同壹(yi)波段的(de)激發(fa)波長。
熒光(guang)蛋白(bai)定位激發(fa)光(guang)源(yuan)采用激發(fa)光(guang)源(yuan)對(dui)動植(zhi)物熒光(guang)蛋白(bai)進(jin)行(xing)激發(fa),需(xu)要特(te)定(ding)的(de)波長,但(dan)是激發(fa)光(guang)源(yuan)在(zai)制(zhi)作的(de)過程(cheng)中(zhong)會參(can)雜(za)到臨近(jin)波(bo)長的(de)光(guang)源(yuan),因為如果(guo)激發(fa)光(guang)源(yuan)的(de)光(guang)源(yuan)不純就(jiu)會對(dui)激發(fa)效果(guo)生(sheng)產(chan)影(ying)響,深(shen)圳熒鴻(hong)激發(fa)光(guang)源(yuan)為了解(jie)決(jue)這(zhe)個問(wen)題,除(chu)了在(zai)激發(fa)光(guang)源(yuan)前增(zeng)加(jia)濾(lv)光(guang)片來消(xiao)除(chu)臨近(jin)波(bo)長的(de)影(ying)響,還(hai)為激發(fa)光(guang)源(yuan)配備(bei)專門的(de)眼鏡(jing),濾掉外(wai)部光(guang)線的(de)影(ying)響,使(shi)效果(guo)更(geng)好(hao)的(de)得(de)以(yi)觀察(cha)。
激發(fa)光(guang)源(yuan)激發(fa)出綠色(se)熒光(guang)時,用黃(huang)色(se)濾(lv)光(guang)鏡(jing)觀測,可(ke)檢(jian)測含綠色(se)熒光(guang)蛋白(bai)(GFP)的(de)生(sheng)物;激發(fa)光(guang)源(yuan)激發(fa)紅(hong)色熒光(guang)時,用紅(hong)色濾(lv)光(guang)鏡(jing)觀測,可(ke)檢(jian)測含紅(hong)色熒光(guang)蛋白(bai)(DsRed)的(de)生(sheng)物。
熒光(guang)蛋白(bai)定位激發(fa)光(guang)源(yuan)能夠方(fang)便(bian)快(kuai)捷對(dui)基(ji)因編(bian)輯的(de)小鼠(shu)、擬南(nan)芥(jie)、大腸桿(gan)菌、本氏煙(yan)草(cao)、玉(yu)米(mi)、水(shui)稻等熒光(guang)蛋白(bai)表(biao)達陽性(xing)的(de)進(jin)行(xing)篩選(xuan),是用於轉(zhuan)基(ji)因研(yan)究(jiu)的(de)方便(bian)快(kuai)捷工(gong)具(ju)。